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免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些?

2017/8/4 15:00:00 人气(4099)

1)抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果,抗原抗体反应有前带和后带效应,必须摸索最佳浓度。

2)抗原修复不全,对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位,以利于与抗体结合;建议微波修复用高火4*6min试试。有人做过实验,这是最佳的时间和次数。若不行,还可高压修复。

3)组织切片本身这种抗原含量低;

4)血清封闭时间过长。

5DAB孵育时间过短。

6)细胞通透不全,抗体未能充分进入胞内参与反应。

7)开始做免疫组化,一定要首先做个阳性对照片,排除抗体等外的方法问题。

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