组织固定、包埋、H&E染色方法 来源：苏州堪赛尔医学检验有限公司         发布时间：2021-08-08 1、固定：取材后标本及时置于10%福尔马林溶液中浸泡，依标本大小决定浸泡时间，大标本可剖开固定。 2、脱水：室温下①75%酒精浸泡3h；②95%酒精过夜；③无水乙醇Ⅰ浸泡45min；④无水乙醇Ⅱ浸泡45min; 45℃下①75%酒精浸泡30min；②95%酒精30min；③无水乙醇Ⅰ浸泡30min；④无水乙醇Ⅱ浸泡30min。根据组织大小、类型适当调整时间。 3、透明：室温下①二甲苯Ⅰ浸泡30min；②二甲苯Ⅱ浸泡30min； 45℃①二甲苯Ⅰ浸泡15min；②二甲苯Ⅱ浸泡15min。根据组织大小、类型适当调整时间。 4、浸蜡：将温度设置在略高于固体石蜡熔点，①蜡Ⅰ浸泡1.5h；②蜡Ⅱ浸泡1.5h； 5、包埋：通常以最大切面向下；用镊子轻压平整。 6、切片：采用石蜡切片机切片，厚度在3um~5um之间，依组织细胞密度、细胞大小决定厚度。 7、H&E染色：①脱蜡至水：二甲苯Ⅰ5min，二甲苯Ⅱ5min，二甲苯Ⅲ5min，无水乙醇1min，95%酒精1min，75%酒精1min，自来水冲洗数秒；②染色：苏木素染3min，自来水冲洗数秒，分化液分化数秒后自来水冲洗返蓝，伊红染液染30s；③脱水：75%酒精30s，95%酒精30s，无水乙醇30s；④透明：二甲苯1min。 8、封片：中性树脂封片，晾干。 *以上所有试剂浸泡时间依试剂新旧程度、气温、标本大小、组织性质调整。 标本需完全浸泡在试剂中，每换到下一道试剂时尽量将前一道试剂沥干。若脱水透明过程中将标本从无水乙醇换至二甲苯时，二甲苯变浑浊，则提示无水乙醇中水分含量较多，脱水未彻底，需更换试剂后重新脱水。更换试剂时，75%酒精弃去，将95%酒精缸中酒精倒入75%缸中代替，无水乙醇Ⅰ倒入95%中，以此类推，节约试剂。 上一条：免疫组化染色方法（SP法） 下一条：没有下一条记录了